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口頭

DNA鎖間架橋損傷修復に特異的にかかわる${it DrygjD}$及び${it DryeaZ}$の機能解析

小野寺 威文; 中村 顕*; 佐藤 勝也; 太田 敏博*; 鳴海 一成

no journal, , 

DNAに対する${it ygjD}$及び${it yeaZ}$遺伝子の持つ機能を調べるために、放射線抵抗性細菌${it Deinococcus radiodurans}$${it ygjD}$, ${it yeaZ}$オルソログである${it DrygjD}$及び${it DryeaZ}$の遺伝子破壊株と、DrYgjDあるいはDrYeaZタンパク質発現プラスミドを遺伝子破壊株に導入した株を作製した。遺伝子破壊効果を調べるために、各遺伝子破壊株をさまざまな変異原で処理し、DNA損傷と当該遺伝子の関連性について分子遺伝学的解析を行った。その結果、${it DrygjD}$及び${it DryeaZ}$遺伝子破壊株は、DNA鎖間架橋剤であるマイトマイシンCに対して著しい感受性を示した。また、遺伝子相補試験の結果、野生型の${it DrygjD}$あるいは${it DryeaZ}$を導入した遺伝子破壊株は、マイトマイシンCに対する感受性が野生株と同程度に回復した。このことから、当該遺伝子はマイトマイシンCに誘起されるDNA架橋損傷の修復に大きくかかわっていることが示唆された。

口頭

超好熱性アーキア${it Thermococcus kodakarensis}$DNAポリメラーゼB遺伝子破壊株のDNA損傷ストレス感受性の解析

櫛田 卓志*; 鳴海 一成; 藤原 伸介*; 今中 忠行*; 東端 啓貴*

no journal, , 

超好熱性アーキア${it Thermococcus kodakarensis}$には、ファミリーB型とファミリーD型の2種類のDNAポリメラーゼの遺伝子がそれぞれ1つずつ見いだされている。ファミリーB型のポリメラーゼPolBは、高いDNA伸長能と正確性を持つなどの特徴から、DNA複製に必須なポリメラーゼで、おもにリーディング鎖の合成を担っていると考えられてきた。しかし、完全遺伝子破壊株が作製できたことから、PolBが細胞の生育に必須ではなく、果たしてDNA複製に必須なのかどうかが疑問視され始めている。本研究では、当該遺伝子の破壊株のDNA損傷ストレスに対する感受性を解析し、${it Thermococcus kodakarensis}$のPolBの機能を推定することを目的とした。その結果、遺伝子破壊株が野生株に比べてさまざまな変異原に感受性を示したことから、PolBはDNA修復に重要な役割を果たしていることが示唆された。

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